La technique ICPL® (Isotope-Coded Protein Label)
 
Elle permet l’analyse comparative de deux (ICPL duplex) ou trois (ICPL triplex) échantillons protéiques complexes. L'analyse ICPL duplex:

Après dénaturation et alkylation, les deux échantillons protéiques sont marqués sur les lysines avec un réactif ICPL (12C/13C6 – Nicotinic acid-succinimide) : l’un avec le réactif léger et l’autre avec le réactif lourd. La différence de masse entre les réactifs lourd et léger est de 6 Da. Après mélange des deux échantillons, les protéines sont séparées suivant des techniques biochimiques classiques puis sont digérées.

Les peptides de digestion ainsi générés sont ensuite analysés par LC-MS/MS sur notre spectromètre de masse LTQ-Orbitrap. Les protéines différentielles sont mises en évidence par le calcul des ratios des paires de peptides lourd/léger détectés et identifiés par spectrométrie de masse.
ICPL
 
Exemple d’application de la technique :
Recherche de protéines différentiellement exprimées dans des cellules ou des tissus après traitement ou induites par un état pathologique
 
Champs d’application :
Protéines cytosolubles et membranaires
Fluides biologiques

Exemple de travaux réalisés sur notre site:
Papaioannou MD, Lagarrigue M, et al., 2011, Mol Cell Proteomics, 10(4):M900587MCP200.
Com E, et al., 2012, Journal of Proteomics, 75(13): 3898-3913.
 
Références :
Schmidt A. et al., 2005 Electrophoresis 5 : 4-15